Maintenance of Epstein–Barr virus-derived episomal vectors in the murine Sp2/0 myeloma cell line is dependent upon exogenous expression of human EBP2

Author： Habel Marie-Eve Drouin Mathieu Jung Daniel

Publisher： NRC Research Press

ISSN： 1208-6002

Source： Biochemistry and Cell Biology, Vol.82, Iss.3, 2004-06, pp. : 375-380

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Abstract

Vectors carrying the origin of replication (oriP) and driving expression of the EBNA-1 protein from Epstein–Barr virus (EBV) replicate as extrachromosomal episomes in human cells. Whether these vectors can be maintained as episomes in murine cells is still controversial. Here we demonstrate that EBNA-1 expression alone was unable to maintain episomal expression of an EBV-based vector in the murine Sp2/0 cell line. However, we were able to obtain long-term episome maintenance in Sp2/0 cells after exogenously expressing human EBP2 by genetic engineering. Our results provide further evidence for the fundamental role of human EBP2 in episomal maintenance of EBV-based vectors. Moreover, we demonstrate that EBV-based vectors can be successfully used in cells presumably incompetent for episomal maintenance.Key words: EBV vector, EBNA-1, EBP2, episomal maintenance, mouse cell, Sp2/0 myeloma cell line.Les vecteurs qui contiennent l'origine de réplication (oriP) et la séquence codante de la protéine EBNA-1 du virus Epstein–Barr (EBV) sont maintenus et se répliquent de façon extrachromosomale dans les cellules humaines. La capacité de maintient extrachromosomale de ces vecteurs dans des cellules de rongeur est toutefois très controversée. Nous démontrons ici que la seule expression de EBNA-1 n'est pas suffisante pour le maintien épisomique des vecteurs à base EBV dans une lignée cellulaire de souris. Par contre l'expression de la protéine humaine EBP2 dans la lignée cellulaire murine Sp2/0 permet le maintien épisomique de ce type de vecteurs dans cette lignée cellulaire. Nos résultats apportent une nouvelle évidence quant au rôle fondamental que joue la protéine humaine EBP2 dans le maintien épisomique des vecteurs à base d'EBV.Mots clés : vecteur EBV, EBNA-1, EBP2, maintien épisomique, cellule de souris, lignée cellulaire myeloma Sp2/0.